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小麦内生菌对幼苗具有抗真菌活性。

从小麦种子中分离出的一种细菌内生菌,能够在幼苗初期定殖于根和茎组织。该分离株命名为JunSE1L,属于该菌属。 萎缩芽孢杆菌在美国进行的实验室测试中,它还抑制了细菌的生长。 增殖镰刀菌 e 冬生毛霉本研究使用了两种真菌作为目标。

该研究评估了冬小麦品种“杜松”(Juniper)的种子。科学家用10%的过氧化氢溶液对种子表面进行消毒。然后,他们将种子置于含有2%琼脂的LB培养基中,在22摄氏度下进行培养。55粒种子中有44粒出现了白色菌落,比例接近80%。

研究团队纯化了两种类型的菌落。这项工作重点分析了较大、表面较粗糙的菌落,称为JunSE1L。通过16S rRNA基因测序鉴定,证实其与已知菌株具有100%的同源性。 萎缩芽孢杆菌.

不同的隔间

该分离株在无菌沙中培养六天后出现在植物的不同部位。研究人员在附着于根部的土壤、根表面、根段以及叶片和茎组织中均发现了菌落。菌落最常出现在组织切口边缘。这一观察结果表明,内生菌在种子萌发过程中从种子中释放出来。

JunSE1L菌株表现出很强的可塑性,且这种可塑性取决于培养基。在LB培养基中,它形成致密、粗糙且疏水的菌落。水滴在菌落表面保持近乎球形的状态约一个半到两个小时。在最小培养基中,菌落铺展得更开,疏水性降低,并在约十分钟内吸收了水滴。

孢子形成

孢子形成过程也发生了变化。在最小培养基中,孢子在第五天出现在母细胞内,第七天游离出来。而在LB培养基中,孢子形成时间更长,直到15天后才出现。

细菌在富营养培养基中形成生物膜。在LB静态液体培养中,JunSE1L菌株在48小时内于气液界面形成厚膜。在相同条件下,在最小培养基中则未观察到生物膜。该结果表明营养物质的有效性对细菌在表面的生活方式有直接影响。

分离得到的菌株能够产生具有表面活性的化合物。在最小液体培养基中培养时,滤液的表面张力从72,2毫牛/米降至约30毫牛/米。该下降发生在指数增长后期。在pH值为2时,沉淀组分的临界胶束浓度估计约为0,125毫克/毫升。

细胞外活动

JunSE1L菌株还表现出与微生物竞争相关的胞外活性。在血琼脂平板上培养三天后,菌落形成溶血晕。在脱脂奶琼脂平板上,菌落形成酪蛋白水解圈,这是蛋白酶分泌的标志。该菌株在Pikovskaya琼脂平板上未检测到磷酸盐溶解活性,在无氮培养基中也未表现出固氮活性。

在活细胞抗真菌试验中,10微升细菌悬液对两种真菌均产生了抑菌圈。抑菌圈中值达到3,0厘米。 冬生毛霉 以及 2,0 厘米 增殖镰刀菌用无菌蒸馏水进行的对照处理并未抑制真菌生长。

无细胞上清液仅对以下物质保持活性: 冬生毛霉 在测试条件下,浸泡在上清液中的滤纸片对该真菌产生了平均直径为 1,5 厘米的抑菌圈。同样的上清液对其他真菌没有产生可检测到的抑制作用…… 增殖镰刀菌科学家在研究中指出:这种效应取决于检测方法的设计和真菌种类。但其中涉及的生化机制尚未明确。

种子表面

将JunSE1L施用于种子表面也显示出剂量依赖性。浓度为10⁴和10⁵ CFU/mL时,种子中几乎没有或完全没有细菌回收。浓度为10⁸ CFU/mL时,每粒种子可回收约10⁵ CFU。浓度为10⁶ CFU/mL时,每粒种子回收的细菌数量接近10² CFU。

在所有测试剂量下,种子均表现出胚根萌发。然而,科学家们并未测量根长、株高或干重。因此,该研究未能证实分离株对幼苗活力的影响。结果表明,JunSE1L 可作为研究小麦种子内生菌及其对植物微生物组初始组装贡献的模型菌株。

更多信息请访问 doi.org/10.3390/seeds5030030

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